作业帮folin-酚法有哪些干扰作用?为什么?应如何注意?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/03 09:14:12
folin-酚法有哪些干扰作用?为什么?应如何注意?
folin-酚法有哪些干扰作用?为什么?应如何注意?
folin-酚法有哪些干扰作用?为什么?应如何注意?
1．干扰物质
此法是在Folin-酚法的基础上引入双缩脲试剂,因此凡干扰双缩脲反应的基团,如-CO-NH2,-CH2-NH2,-CS-NH2以及在性质上是氨基酸或肽的缓冲剂,如Tris缓冲剂以及蔗糖,硫酸铵,巯基化合物均可干扰Folin-酚反应.此外,所测的蛋白质样品中,若含有酚类及柠檬酸,均对此反应有干扰作用.而浓度较低的尿素（约0.5%左右）,胍（0.5%左右）,硫酸钠（1%）,硝酸钠（1%）,三氯乙酸（0.5%）,乙醇（5%）,乙醚（5%）,丙酮（0.5%）对显色无影响,这些物质在所测样品中含量较高时,则需做校正曲线.若所测的样品中含硫酸铵,则需增加碳酸钠—氢氧化钠浓度即可显色测定.若样品酸度较高,也需提高碳酸钠—氢氧化钠浓度1—2倍,这样即可纠正显色后色浅的弊病.
2．控制时间
因Lowry反应的显色随时间不断加深,因此各项操作必须精确控制时间.即第1支试管加入2.0ml碱性硫酸铜试剂后,开始计时,1分钟后,第2支试管加入2.0ml碱性硫酸铜试剂,2分钟后加第3支试管,以此类推.全部试管加完碱性硫酸铜试剂后若已到10分钟,则第1支试管可立即加入0.20ml Folin-酚试剂,1分钟后第2支试管加入0.20ml Folin-酚试剂,2分钟后加第3支试管,以此类推.40℃水浴10min,冷却后,每一分钟测定一管吸光值.
此法是在Folin-酚法的基础上引入双缩脲试剂，因此凡干扰双缩脲反应的基团，如-CO-NH2,-CH2-NH2,-CS-NH2以及在性质上是氨基酸或肽的缓冲剂，如Tris缓冲剂以及蔗糖，硫酸铵，巯基化合物均可干扰Folin-酚反应。此外，所测的蛋白质样品中，若含有酚类及柠檬酸，均对此反应有干扰作用。而浓度较低的尿素（约0.5%左右），胍（0.5%左右），硫酸钠（1%），硝酸钠（1%），三氯乙酸（0...
全部展开
此法是在Folin-酚法的基础上引入双缩脲试剂，因此凡干扰双缩脲反应的基团，如-CO-NH2,-CH2-NH2,-CS-NH2以及在性质上是氨基酸或肽的缓冲剂，如Tris缓冲剂以及蔗糖，硫酸铵，巯基化合物均可干扰Folin-酚反应。此外，所测的蛋白质样品中，若含有酚类及柠檬酸，均对此反应有干扰作用。而浓度较低的尿素（约0.5%左右），胍（0.5%左右），硫酸钠（1%），硝酸钠（1%），三氯乙酸（0.5%），乙醇（5%），乙醚（5%），丙酮（0.5%）对显色无影响，这些物质在所测样品中含量较高时，则需做校正曲线。若所测的样品中含硫酸铵，则需增加碳酸钠—氢氧化钠浓度即可显色测定。若样品酸度较高，也需提高碳酸钠—氢氧化钠浓度1—2倍，这样即可纠正显色后色浅的弊病。
收起
同学~你不用在百度问别人了。。。因为别人也不会知道，我出的题你以为百度可以找得到吗？太低估我了吧！！！