免疫组化BCA法是什么意思?最好是能具体点,

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/04/30 00:06:36

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免疫组化BCA法是什么意思?
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Bicinchoninic acid (BCA )法是近来广为应用的蛋白定量方法.其原理与Lowery法蛋白定量相似,即在碱性环境下蛋白质与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+.BCA与Cu1+结合形成稳定的紫蓝色复合物,在562 nM处有高的光吸收值并与蛋白质浓度成正比,据此可测定蛋白质浓度.与Lowery法相比,BCA蛋白测定方法灵敏度高,操作简单,试剂及其形成的颜色复合物稳定性俱佳,并且受干扰物质影响小.与Bradford法相比,BCA法的显著优点是不受去垢剂的影响.
　　器材
　　1.7220型分光光度计
　　2.比色杯
　　3.恒温水浴箱
　　4.中试管7支
　　5.枪式移液管
　　试剂
　　1.试剂A：1％BCA二钠盐
　　2％无水碳酸钠
　　0.16%酒石酸钠
　　0.4％氢氧化钠
　　0.95％碳酸氢钠
　　混合调PH值至11.25.
　　2.试剂B：4％硫酸铜.
　　3.CA工作液：试剂A?100ml?试剂B?2ml混合.
　　4.蛋白质标准液：用结晶牛血清白蛋白根据其纯度用生理盐水配制成1.5mg/ml的蛋白质标准液.（纯度可经凯氏定氮法测定蛋白质含量而确定）
　　5.待测样品：用双缩脲测定法的样品稀释而成.
　　具体可参照

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