RT PCR只跑出内参的条带,没有目的基因,原因有哪些?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/06 14:51:27
RT PCR只跑出内参的条带,没有目的基因,原因有哪些?

RT PCR只跑出内参的条带,没有目的基因,原因有哪些?
RT PCR只跑出内参的条带,没有目的基因,原因有哪些?

RT PCR只跑出内参的条带,没有目的基因,原因有哪些?
我也遇到过这种问题,个人觉得可能是目的基因的定量引物不好,还有就是要优化PCR条件!

1.引物;2目的基因是否整合;3PCR体系是否合适(主要是退火温度);4.RNA完整性

如果内参跑出来了,目的基因没有,一般可能是引物的问题,还有PCR设计条件的问题。不能是RNA降解。

RT PCR只跑出内参的条带,没有目的基因,原因有哪些? 为什么我的RT-PCR内参跑不出来.目的条带到是跑出来了 PCR跑出的条带与目的条带不同怎么办 做RT-PCR时,上下引物退火温度一定要一样吗?内参条带很亮,为什么没有目的基因? RT-PCR 刚刚换了新的mmlv和RRI,其他的oligodt,dntp,taq,引物等试剂都至少半年了.没换新试剂之前做了几次,每次都是marker很清楚,目的条带和内参都没有,每个通道只在100bp位置有条带,就认为是二聚体 用RT-PCR检测目的基因的表达情况,需将内参基因的条带亮度调成一致.用RT-PCR检测目的基因的表达情况,需将内参基因的条带亮度调成一致,这个很费事,我一般是配50ul的内参基因pcr反应体系,分几 用RT-PCR检测目的基因表达差异,需将内参基因的电泳条带亮度调成一致.用RT-PCR检测目的基因表达差异,需将内参基因的电泳条带亮度调成一致,这个很费事,我一般是在一个管里配50ul的内参基因 PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带 我做的RT-PCR怎么样让内参一致?刚入门 老板让做内参的条件 反复做也没有要P出来的目的条带 我的退火温度是55 可以的 但是用这个条件去P 其他的样就P不出来 应该怎么办? PCR酶跑胶结果mark是连续的,目的条带没有一条跑出来.什么原因.求帮忙今天下午跑胶结果几乎全军覆没,目的条带没有一条是跑出来的,而mark条带跑出来时连续的不是条带状,这是什么原因 提取IBDV基因组RNA,然后RT-PCR,结果跑出条带700bp左右,原因是什么啊!目的条带应该是3000bp左右. 怎样摸索PCR条件我做的 RT-PCR 以内参为对照进行条件摸索 但是就是P出不来条带 PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常. RT PCR为何都要跑电泳,在PCR的时候为何要加内参?是为了判断是否是PCR过程中出现问题?内参跑不出来而cDNA能跑出来是怎么回事,相反又是怎么回事? RT-PCR只有引物二聚体而没有目的条带怎么办?我已经重新设置引物了 PCR目的条带的问题,cDNA模板没有问题,因为我的actin能跑出来.可是我的目的条带一直扩不出来,换了引物还是不管用.用别人肯定扩出来的引物去P,还是没有目的条带.这是为什么啊? ,第一次做荧光定量PCR,内参基因可以跑出来,但是荧光峰度比较低,溶解曲线也不错,但目的基因完全跑不出目的基因在普通PCR仪上,可以跑出来,跑电泳条带清晰,引物二聚体不明显.但是在realtime-p 请问RT-PCR:RNA跑胶没有明显条带,能否做成目标片段RNA的PCR?