原代培养的基本操作流程

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/04/28 14:33:17

原代培养的基本操作流程
原代培养的基本操作流程

原代培养的基本操作流程
原代分离细胞培养是指从供体内取出组织后,经机械以及消化分离成单个细胞或单一型细胞群,使之在体外模拟人体生理环境,在无菌、适当温度和一定的营养条件下,生存、生长和繁殖.原代培养细胞常有不同的细胞成分,生长缓慢,但是更能代表所来源的组织细胞类型和表达组织的特异性特征.利用原代细胞培养做各种实验,如药物测试、细胞分化及病毒学方面的试验效果很好.其操作步骤如下.
1.剪切组织　先将所取得的组织,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手术镊去除黏附的结缔组织等非培养所需组织.再次清洗后,用手术刀将组织切成若干小块,移入青霉素小瓶或小烧杯中,加入适量缓冲液,用弯头眼科剪,反复剪切组织,直到组织成糊状,约1mm3大小.静置片刻后,用吸管吸去上层液体,加入适当的缓冲液再清洗一次.
2.消化分离　消化分离的目的是将细小的组织块消化分离成细胞团或分散的单个细胞,以利于进一步的培养,常用的消化酶有胰蛋白酶和胶原酶.
3.培养　细胞悬液用计数板进行细胞计数.用培养液将细胞数调整为（2～5）×105 cells／ml,或实验所需密度,分装于培养瓶中,使细胞悬液的量以覆盖后略高于培养瓶底部为宜.置CO2培养箱内,5％CO2,37℃静置培养.一般3～5d,原代培养细胞可以黏附于瓶壁,并伸展开始生长,可补加原培养液量1／2的新培养液,继续培养2～3d后换液,一般7～14d可以长满瓶壁,进行传代.

原代培养的基本操作流程航空货代操作的具体流程细胞原代培养操作中容易犯哪些错误? 动物细胞培养的流程是怎样的?人教版新课标的教材中认为流程是：原代培养－－传代培养,然后就是一直传代培养了.而有的问题中的答案却是另一种情况：原代培养－－传代培养－－细胞株细胞原代培养的意义简述细胞原代培养的过程. 谁能说一下原代培养和传代培养的区别原代培养就是最初的传代培养吗? 原代培养与传代培养的异同是什么? 原代培养的细胞每代(包括原代)都需要冻存吗? 请问在原代培养和传代培养中的“代”具体指的的是什么? 请问在原代培养和传代培养中的“代”具体指的的是什么? 基因工程基本操作流程速求! 细胞原代培养的实验的思考题怎样提高细胞原代培养的效率? 威斯腾生物培养的原代细胞好不好? 请问哪里可以做心肌细胞的原代培养? 请问哪里可以做心肌细胞的原代培养?